近年來，隨著分子生物學(xué)技術(shù)的迅速發(fā)展，基于核酸檢測(cè)的診斷方法已大量建立并廣泛應(yīng)用于人類疾病的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)中，恒溫恒濕機(jī)組恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)便是其中一種，與其他的核酸擴(kuò)增技術(shù)相比，恒溫?cái)U(kuò)增有快速、高效、特異的優(yōu)點(diǎn)且無需專用的設(shè)備，所以它一經(jīng)出現(xiàn)就被許多學(xué)者認(rèn)為是一種有可能與PCR媲美的檢測(cè)方法。

當(dāng)前常見的等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)有環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)、鏈替代等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)、滾環(huán)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)、依賴解旋酶等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)、依賴核酸序列等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)、單引物等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)和核酸快速等溫檢測(cè)放大等技術(shù)。

為了更好地有選擇地開發(fā)利用這方面技術(shù)，恒溫恒濕機(jī)組現(xiàn)就這些等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)的原理、特點(diǎn)及應(yīng)用進(jìn)行簡(jiǎn)要總結(jié)。

環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增其擴(kuò)增原理是基于DNA在65℃左右處于動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)，恒溫恒濕機(jī)組任何一個(gè)引物向雙鏈DNA的互補(bǔ)部位進(jìn)行堿基配對(duì)延伸時(shí)，另一條鏈就會(huì)解離，變成單鏈，在此前提下利用4種不同的特異性引物識(shí)別靶基因的6個(gè)特定區(qū)域，在鏈置換型DNA聚合酶的作用下，恒溫恒濕機(jī)組以外側(cè)引物區(qū)段的3`末端末端為起點(diǎn)，與模板DNA互補(bǔ)序列配對(duì)，啟動(dòng)鏈置換DNA合成。

LAMP的優(yōu)勢(shì)：

（1）擴(kuò)增效率高，能夠在1h內(nèi)有效的擴(kuò)增1-10拷貝的目的基因，擴(kuò)增效率是普通PCR的10倍-100倍

（2）反應(yīng)時(shí)間短，特異性強(qiáng)，不需要特殊的設(shè)備

LAMP的劣勢(shì)：

（1）對(duì)引物的要求特別高

（2）擴(kuò)增產(chǎn)物不能用于克隆測(cè)序，只能用于判斷

（3）由于其敏感性強(qiáng)，特別容易形成氣溶膠，造成假陽性影響檢測(cè)結(jié)果

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