一、區(qū)域劃分

按功能可分為：實驗區(qū)、準備區(qū)和辦公區(qū)。

01

實驗區(qū)

樣品接收區(qū)：

接收提交臨床檢驗的體液和石蠟樣本，核對患者信息，并對接收樣本進行登記和編號。 體液樣本4℃保存并及時處理。

樣品前處理區(qū)：

用于組織切片、脫蠟、染色及離心、涂片、血液、尿液、胸膜腹水等標本的染色。 在檢測系統(tǒng)突變時，需要對組織學或細胞學樣本進行病理質(zhì)量控制。 目的是進一步明確病變組織或細胞是否與病理診斷相符； 評價腫瘤細胞比例是否符合檢測要求； 確定腫瘤細胞的位置并富集腫瘤。 細胞，避免出血、壞死、間質(zhì)細胞影響DNA質(zhì)量。 由于該區(qū)域使用二甲苯等有毒有害物質(zhì)，必須設(shè)置通風柜進行化學安全防護，并配備廢液桶，對廢棄的二甲苯等化學污染物進行統(tǒng)一回收處理。

試劑暫存及配制區(qū)：

試劑暫存區(qū)應(yīng)配備4℃和-20℃以下的冰箱，根據(jù)試劑的貯存條件分別存放，并記錄使用情況。 配制區(qū)根據(jù)反應(yīng)體系配制各種反應(yīng)試劑。

制樣區(qū)：

石蠟樣本癌組織富集、樣本消化、DNA和RNA提取及OD值測定。 區(qū)域設(shè)置外放式二級生物安全柜，減少實驗過程中產(chǎn)生的有害氣溶膠對實驗人員和環(huán)境的危害。 特別是用于檢測種系突變的血液樣本和攜帶各種病毒的樣本，需要在生物安全柜中操作酒窖恒溫恒濕機，以確保生物安全防護。 如果計劃開展超靈敏方法檢測血液中微量循環(huán)DNA的項目，必須獨立劃分此區(qū)域進行微量循環(huán)DNA的提取，防止微量循環(huán)DNA被污染。其他樣品中的高濃度 DNA。

核酸片段化區(qū)域：

樣品核酸的片段化。 該區(qū)域可能產(chǎn)生核酸氣溶膠，屬于核酸污染區(qū)域，需要進行相應(yīng)的防護清潔處理。

區(qū)域的PCR擴增：

第一次 PCR 擴增。 PCR過程中會產(chǎn)生大量核酸短片段恒溫恒濕空調(diào)機，是核酸氣溶膠的重要來源。 該區(qū)域為核酸污染區(qū)域。 必須避免在 PCR 反應(yīng)過程中爆管和 PCR 反應(yīng)結(jié)束后打開蓋子。 一旦發(fā)生，要做好記錄，及時清理核酸污染，監(jiān)測空氣中是否有氣溶膠。

產(chǎn)品分析領(lǐng)域：

對PCR產(chǎn)物或核酸片段進行電泳檢測。 核酸斷裂分為機械斷裂和酶消化斷裂。 機械碎裂后的產(chǎn)物需要進行電泳檢測，以評價核酸的碎裂狀態(tài)。 該區(qū)域存在對核酸片段化或PCR擴增后的產(chǎn)物進行開蓋操作，也是核酸氣溶膠的重要來源地恒溫恒濕實驗室設(shè)計，屬于核酸污染區(qū)域。

凈化第一區(qū)：

第一次PCR產(chǎn)物純化、第一次雜交、第一次捕獲、第二次雜交、第二次捕獲和捕獲樣品純化。 該區(qū)域存在對PCR擴增后產(chǎn)物進行開蓋操作，是核酸氣溶膠的重要來源，屬于核酸污染區(qū)域。

第二區(qū)域的PCR擴增：

第二次PCR擴增。 注意事項同PCR擴增。

第二區(qū)凈化：

二次PCR產(chǎn)物純化及文庫檢測。 注意事項同凈化區(qū)。

測序區(qū)域：

放置用于機上排序的排序器。 該區(qū)域本身不產(chǎn)生核酸氣溶膠，但需要采取防止氣溶膠污染的措施，屬于核酸半污染區(qū)域。

數(shù)據(jù)分析區(qū)：

數(shù)據(jù)處理和分析、結(jié)果解釋和報告打印。 該區(qū)域本身不產(chǎn)生核酸氣溶膠，屬于核酸半污染區(qū)。 另外，如果建立熒光原位雜交檢測平臺，還需要獨立設(shè)置以下兩個區(qū)域：

熒光原位雜交區(qū)：該區(qū)主要用于低滲、預(yù)固定、固定、滴加、老化、消化、洗滌、變性、雜交、復(fù)洗。 該區(qū)域處理可能攜帶生物危害的血液和骨髓、尿液或其他體液必須配備生物安全柜或通風柜，以防止生物污染物對工作人員造成傷害。 熒光原位雜交觀察區(qū)：避光，安裝熒光顯微鏡，觀察結(jié)果。

2個

實驗準備區(qū)

高溫滅菌室：

配備高壓蒸汽滅菌器和高溫烘箱，設(shè)備功率大，配電需單獨線路。 由于高壓蒸汽設(shè)備，該區(qū)域空氣交換12次/小時。

危險品倉庫：

該區(qū)域應(yīng)遠離實驗室和辦公區(qū)域，安全出口應(yīng)暢通無阻。 所有危險化學品必須存放在鐵柜中。 對有腐蝕性、易燃易爆的試劑，應(yīng)采取防腐防爆和通風措施恒溫恒濕機品牌，鐵柜應(yīng)安裝掛鎖，鑰匙應(yīng)由專人保管。 危險品倉庫應(yīng)配備滅火器和砂桶，以防火災(zāi)。

一般倉庫：

收納移液槍頭、離心管等，貼近墻壁安裝擱板，有序擺放各類耗材，方便取用。

試劑儲藏室：

試劑保存分為常溫保存（18℃-26℃）、冷藏保存（2℃-8℃）和冷凍保存（-20℃以下）。 試劑儲藏間的冰箱、冰柜熱量大，需要安裝通風系統(tǒng)，注意環(huán)境溫度的控制。 冰箱和冰柜應(yīng)配備帶有警告的溫度監(jiān)控系統(tǒng)。 當溫度異常時，會發(fā)出警報，工作人員可以及時處理，避免試劑失效。

3個

辦公區(qū)

主要用于實驗人員的工作、學習和休息。 為潔凈區(qū)，需遠離生物污染區(qū)和危險品倉庫。 對于步驟多、流程長的檢測平臺，為防止污染，實驗室功能區(qū)設(shè)計應(yīng)盡可能細分。 如果實驗室擁有多個檢測技術(shù)平臺，可根據(jù)所用儀器的功能，對功能區(qū)進行適當組合。 筆者認為，實驗室污染分為生物污染和核酸污染。 生物污染主要在體液樣本處理區(qū)域，而核酸污染主要在核酸提取、擴增和分析區(qū)域。 據(jù)此，實驗室應(yīng)根據(jù)生物污染對象分為生物污染區(qū)、生物半污染區(qū)和生物潔凈區(qū)。 實驗室也可分為核酸污染區(qū)、核酸半污染區(qū)和核酸潔凈區(qū)。 區(qū)域。

2.氣流方向

PCR實驗室易發(fā)生短核酸片段形成的氣溶膠污染。 氣溶膠是由粒徑為0.001μm～100μm的固體或液體微小顆粒懸浮在氣體介質(zhì)中形成的一種相對穩(wěn)定的分散體系。 一旦出現(xiàn)核酸氣溶膠污染，將直接導(dǎo)致核酸檢測結(jié)果出現(xiàn)誤差，而且這種污染很難去除。 為防止核酸氣溶膠污染，各功能區(qū)需安裝獨立的通風系統(tǒng)，密閉恒溫恒濕實驗室設(shè)計，不允許交叉通風，避免交叉污染。

實驗室通風時，氣流應(yīng)上下送風。 送風口和排風口的布置應(yīng)便于室內(nèi)污染空氣的排出。 生物安全柜操作面附近或其他產(chǎn)生氣溶膠的地方應(yīng)無氣流。 設(shè)置出風口。 各區(qū)域換氣12次/h～16次/h。 實驗室也可采用開窗自然通風，但需配備防蟲網(wǎng)和防節(jié)肢動物設(shè)施。 有條件的實驗室可安裝負壓裝置。 功能區(qū)內(nèi)氣壓（負壓）與室外大氣壓的壓差≥30Pa，與相鄰區(qū)域的氣壓差（負壓）≥10Pa。

3.緩沖區(qū)

實驗功能區(qū)需要設(shè)置緩沖間來控制空氣的流動。 緩沖間的門具有聯(lián)鎖功能，不能同時打開。 緩沖室內(nèi)設(shè)置洗手裝置、衣架或不帶手動開關(guān)的衣柜，方便實驗者進出更換實驗服。 不同功能區(qū)的緩沖區(qū)之間應(yīng)穿不同顏色的工作服，工作人員離開緩沖區(qū)時不得將工作服帶出。

4.應(yīng)急設(shè)置

樣品前處理區(qū)和制樣區(qū)應(yīng)設(shè)置緊急沖淋洗眼器和緊急沖淋裝置，以方便應(yīng)急處理。 實驗室應(yīng)配備火災(zāi)自動報警裝置和應(yīng)急照明裝置。 安全通道應(yīng)有消防疏散標志，并配備適用的應(yīng)急設(shè)備，如消防設(shè)備、事故處理設(shè)備、急救設(shè)備等。

5、溫濕度控制

放置大型精密儀器的測序區(qū)、PCR擴增區(qū)1、2區(qū)應(yīng)恒溫恒濕，相對濕度控制在30%～70%。 溫度應(yīng)控制在18℃至26℃范圍內(nèi)，2小時內(nèi)溫度波動應(yīng)小于2℃，避免環(huán)境因素影響實驗結(jié)果。

6.二級生物安全實驗室

二級生物安全實驗室用電負荷不應(yīng)低于二級。 大型重要精密設(shè)備需要單獨的配電線路，并配備不間斷電源（UPS）以保證供電電壓的穩(wěn)定。 此外，各功能區(qū)需配備定時紫外線燈。 紫外線燈發(fā)射波長為254nm的紫外線，可將核酸長片段打斷，既防止生物污染，又防止核酸污染。 安裝在拋光天花板上的固定式紫外燈與地面的距離<2.1m，紫外燈的數(shù)量根據(jù)每個區(qū)域的空間來確定，以保證照射劑量>·s/cm。

核心產(chǎn)品為實驗室家具、實驗室通風與廢氣處理、實驗室凈化、供氣系統(tǒng)、醫(yī)用家具； 核心服務(wù)為實驗室規(guī)劃設(shè)計、實驗室工程EPC、實驗室售后服務(wù)

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